细说尿沉渣分析

　　尿沉渣(urinary sediment)检查是用显微镜对尿沉淀物进行检查,识别尿液中细胞、管型、结晶、细菌、寄生虫等各种病理成分;辅助对泌尿系统疾病作出诊断、定位、鉴别诊断及预后判断。干化学试纸带受诸多因素的影响,不同尿液分析仪检测的灵敏度也有一定差异。目前,任何一种尿液分析仪只能作为显微镜检查的过筛实验,即使近年国外研制的电脑遥控显像尿液分析仪,可进行无玻片镜检及红白细胞大小分布直方图的报告,也不能完全取代显微镜,因此需要与尿沉渣检测联合应用。在一般性状检查或化学试验中不能发现的变化,常可通过沉渣检查来发现,如尿蛋白检查为阴性者而镜检却可查见少量的红细胞。说明在判断尿沉渣结果时,必须将物理、化学检查结果相互参照,并结合临床资料等进行综合分析判断。

一、尿沉渣分析技术的发展

　　近年来尿沉渣有形成分的检查在利用显微镜检查的基础上有了多方面的进展:
　　(1)利用干化学试带检查尿中白细胞、红细胞等有形成分;
　　(2)利用平面流动池中连续位点图像摄影系统,摄制尿沉渣粒子的静止图像,对尿沉渣粒子进行自动分类、储存等,形成独立的尿沉渣自动分析仪;
　　(3)除利用普通显微镜检查外,还可采用干涉、相差、偏振光、扫描及透射电镜等。如在干涉显微镜下观察尿沉渣中细胞管型,由于能观察“三维空间”,因此清晰度明显提高;相差显微镜中由于视野中明暗反差大,故对不典型红细胞及血小板易于识别。在新鲜血尿及运动后血尿中均可见到血小板,但在普通光学显微镜下常被漏检;用透射电镜对尿沉渣的超薄切片进行观察时,可准确地诊断细菌管型,白色念珠菌管型及血小板管型等,而这些管型在普通光学显微镜下常被误认为细颗粒及粗颗粒管型;用偏振光显微镜检查尿沉渣,易识别脂肪管型中的脂肪成分。如肾病综合征时,尿沉渣的脂肪管型经偏振光显微镜检查后可见到具特异形象的胆固醇酯,即在管型黑色背景中嵌有大小不等明亮球体,中心为黑色的十字架形状,这对确认本病有重要意义。偏振光显微镜还可对尿沉渣各种结晶进行识别和确认,这对泌尿系统结石诊断有一定价值;
　　(4)现已采用尿沉渣活体染色及细胞化学染色等多种染色法来识别各种管型,如甲紫-沙黄染色,可识别管型(尤其是透明管型)及各种形态的红细胞、上皮细胞、并能区别存活及死亡的中性粒细胞和检出闪光细胞;用巴氏染色观察有形成分的细微结构,对尿路肿瘤细胞和肾移植排异反应具诊断意义;其他如阿利新蓝-中性红等的混合染色剂也有助于尿沉渣成分的识别;细胞过氧化物酶染色可鉴别不典型红细胞与白细胞,并可区别中性了粒细胞管型及肾上皮细胞管型;用酸性磷酸酶染色,可区分透明管型与颗粒管型,经染色后发现透明管型应属颗粒管型范畴;
　　(5)近年来应用单克隆抗体技术识别各种细胞,临床上可根据出现的不同的细胞而诊断一些疑难的肾病如新月体肾炎,药物引起的急性间质性肾炎、肾小管坏死等。
　　目前尿沉渣检测的筛查已可通过自动化尿沉渣分析仪来完成,尿沉渣分析仪大致有两类,一类是利用图形识别法,通过尿沉渣直接显微镜摄影,再人为对影像进行分析得出相应的技术资料与实验结果;另一类是利用流式细胞术原理,直接分析尿液中各类细胞的性质及数量。l988年,美国国际遥控影像系统有限公司研制生产了世界上第一台"Yollow IRIS"高速摄影机式的尿沉渣自动分析仪。这种仪器是将标本的粒子影像展示在计算机的屏幕上,由检验人员加以鉴别。1990年,日本东亚医疗电子有限公司与美国国际遥控影像系统有限公司合作,生产出影像流式细胞术的UA-1000型尿沉渣自动分析仪,随后又生产了UA-2000型。虽然,此类仪器对原来的尿液分析仪进行了较大的改革,但由于对图像粒子测绘不十分满意,处理能力低,重复性差,管型分辩不清,价格昂贵等,未能普及。1995年,日本东亚医疗电子有限公司在原来影像式细胞式尿沉渣自动分析仪的基础上,将流式细胞术和电阻抗技术结合起来。研制生产出新一代UF-lOO型全自动尿沉渣分析仪(UF-100 Fully Automated Urine Cell Analyzer)。该仪器具有快速、操作方便,且同时得出尿沉渣有形成分的定量结果和红细胞、白细胞散射光分布直方图,便于临床诊治和科研。1996年德国宝灵曼公司生产出新一代的名为SEDTRON以影像系统配合计算机技术的尿沉渣自动分析仪。尿沉渣仪器的发展,检测标准的不断完善为临床医疗和科研提供了更为准确和详细的客观资料。

二、尿沉渣检测原理

　　尿沉渣检查不论从计数原理还是方法学方面均有别于干化学,全自动尿沉渣分析仪将尿液样品放入进样槽后,仪器会自动吸样、染色、计算,还可储存、打印结果。目前常用的有IRIS和UF-lOO型两种类型的自动化器。IRIS由频闪(strobe)光源灯、相聚光镜、流动样品池及彩色摄像机等组成工作站。UF-lOO是按流式细胞术和电阻抗原理设计的新型尿沉渣分析仪。该仪器所用尿液不需离心,但要经荧光染色。尿液经液流聚焦使有形成分有序地吸入测定管道后,同时检测电阻抗、激光照射后发射的荧光强度和在前向角测定的散射激光强度以及脉冲时间◇再用电脑加以综合分析,在屏幕上显示各种散点图和直方图并打印出结果和图形。由于各种细胞、管型、细菌等的大小、形状、内部结构和结合荧光染料的多少不同,故可加以区分。该仪器还可以同时测定电导率,用以间接推算
比重。值得一提的是,仪器可检测一般不为检验人员所注意的细菌;同时还可将红细胞分为均一型、不均一型和混合型,对鉴别红细胞来源(肾小球、肾小管或是下泌尿道)有参考价值。（一）